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技術(shù)文章
2023-28
高效液相色譜柱液相色譜柱分為三種基本類(lèi)型：液-液、液-固和離子交換。液-液柱不太受歡迎，因?yàn)樗鼈兊姆€(wěn)定性有限且使用不便。在液固柱中，固定相是固體，分析物被吸收到固定相中，從而分析混合物的組成。通常，HPLC之前裝有保護(hù)柱，以保護(hù)和延長(zhǎng)分析柱的使用壽命。保護(hù)柱的作用是去除柱中不可逆的顆粒、污染物、分子等。您還可以選擇C18堿性HPLC色譜柱、苯醚HPLC色譜柱、C8/C18標(biāo)準(zhǔn)HPLC色譜柱和其他HPLC色譜柱使用。常用的HPLC色譜柱由不銹鋼制成，但也可以由厚玻璃、聚合物（如...
查看更多2023-27
許多因素都會(huì)影響峰形和保留時(shí)間，例如色譜柱尺寸、流動(dòng)相添加劑和分析物特性。在液相色譜方法開(kāi)發(fā)中，柱溫是一個(gè)重要且經(jīng)常被忽視的因素。這是因?yàn)橹鶞貢?huì)影響峰形、保留和背壓。關(guān)于保留時(shí)間，隨著柱溫的升高，保留時(shí)間會(huì)減少。這是因?yàn)椋V柱的溫度越高，分析物在色譜柱的固定相和流動(dòng)相之間交換得越快。隨著這個(gè)過(guò)程變得越來(lái)越快，分析物的保留時(shí)間不會(huì)變長(zhǎng)，從而導(dǎo)致保留時(shí)間更短，峰形通常更有效。但是，請(qǐng)記住，升高溫度對(duì)所有分析物的影響并不相同，這意味著保留因子對(duì)每種分析物的影響可能不同。例如，在下...
查看更多2022-1229
色譜柱在使用前，*好進(jìn)行柱的性能測(cè)試，并將結(jié)果保存起來(lái)，作為后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行（出廠測(cè)試所使用的條件是佳條件），只有這樣，測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。液相色譜柱的使用注意事項(xiàng)(1)液相色譜柱色譜柱使用前注意事項(xiàng)：液相色譜柱的儲(chǔ)存液無(wú)特殊說(shuō)明，均為評(píng)價(jià)報(bào)告所示的流動(dòng)相。在使用前，一定要注意液相色譜柱的儲(chǔ)存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃...
查看更多2022-1130
HPLC中使用的流動(dòng)相直接影響樣品中組分的保留和差異遷移，從而對(duì)樣品的分離產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。因此，正確且盡可能一致地進(jìn)行流動(dòng)相制備至關(guān)重要。以下是流動(dòng)相制備的一些提示和技巧，可確保分離和分析的*高準(zhǔn)確度。使用簡(jiǎn)單的流動(dòng)相使用簡(jiǎn)單的流動(dòng)相將獲得更穩(wěn)定、更易于轉(zhuǎn)移的方法。這些方法使組織受益，因?yàn)楫?dāng)實(shí)施可靠的方法時(shí)，故障排除和停機(jī)時(shí)間將降至最·低。使用適當(dāng)?shù)燃?jí)的溶劑和試劑構(gòu)成流動(dòng)相的組分必須具有最高純度，這一點(diǎn)至關(guān)重要。對(duì)于溶劑，應(yīng)根據(jù)應(yīng)用使用正確的牌號(hào)。當(dāng)涉及到試劑時(shí)，它們必須具有...
查看更多2022-1125
除非另有說(shuō)明，反相柱應(yīng)始終使用至少5%的有機(jī)改性劑。在95%到100%的水溶液條件下，色譜柱可能會(huì)發(fā)生去濕/相塌陷，這意味著流動(dòng)相會(huì)由于表面張力而從多孔系統(tǒng)中排出。該問(wèn)題通常發(fā)生在流停止時(shí)。如果色譜柱已去濕，則可以通過(guò)泵送10到20個(gè)柱體積的純甲醇/乙腈或含有至少50%有機(jī)改性劑的流動(dòng)相來(lái)恢復(fù)它，但不能保證它會(huì)起作用。這種現(xiàn)象在C18和C8色譜柱中極為常見(jiàn)，其他反相色譜柱也應(yīng)避免這種現(xiàn)象，以確保色譜的穩(wěn)定性。事實(shí)上，C8和C18鏈形成了一個(gè)非常疏水的層，所以當(dāng)流動(dòng)相的有機(jī)含量...
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